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许秋何恒进

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第1038章 彭月娇怪病的破局!最终真相!
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  比如ELISA法检测抗嗜沫凝聚杆菌IgG/IgM抗体……

  然而最终的结果,OD值始终小于0.1,这提示完全没有特异性抗体结合!

  此外,WesternBlot分析中,倒是差点取得了成绩。

  莫雷蒂组,在65kDa处出现微弱条带!

  然而令人遗憾的是,质谱鉴定为细菌Hsp60!

  这并不是致病性抗体,与嗜沫凝聚杆菌没有半点关系!

  “失败的原因,大概率是因为Hsp60与人类Hsp60同源性高,导致交叉反应……”许秋分析。

  因而第三轮改良,许秋又针对免疫荧光染色做出改动,尝试定位活菌!

  手法也很简单。

  首先,是细菌固定与载片制备。

  活嗜沫凝聚杆菌悬液用4%多聚甲醛固定15分钟,随后滴加10微升至聚赖氨酸包被的载玻片,室温干燥……

  随后进行封闭与抗体孵育、封闭液,采取3%BSA-PBS封闭30分钟。

  一抗,利用患者血清1:50稀释,湿盒内37摄氏度孵育1小时。

  二抗则FITC标记抗人IgG,避光孵育1小时……

  最终,在激发波长488nm的荧光显微镜下,发现了微弱背景荧光!

  而同一时间,放射性标记活菌追踪却让人绝望。

  18F-FDG标记、SD大鼠经尾静脉注射18F-FDG标记菌悬液建立动物模型,最后PET-CT成像……

  然而,不管是实验组还是对照组,都没有显示任何特异性放射性浓聚灶!

  “各个组别,结果表现都比较一致,即便有反应,也是交叉反应……与嗜沫凝聚杆菌无关。”邱伟道。

  说实话,此时他有点怀疑,嗜沫凝聚杆菌致病的研究方向是不是搞错了。

  唯一有点用的,大概就是免疫荧光染色发现的微弱荧光了……迄今为止,都没法确定这种微弱荧光来自哪儿,究竟是致病菌的抗原抗体结合,还是说——又是一个误会?

  而就在这时候,许秋却是放下了这些资料,他抬起头来,起身往外走去,道:“走吧,复现的办法我基本上已经猜到了,接下来结束这场实验。”

  听到这话,邱伟霍然睁大眼睛,脸上尽是惊骇与狂喜!
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